Гост на определение красителей в напитках

Спасибо за заявку!

В ближайшее время с вами свяжется специалист и проведет консультацию!

Текст ГОСТ 33406-2015 Продукция алкогольная, безалкогольная и соковая, добавки вкусоароматические. Определение содержания синтетических красителей методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ. МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION. METROLOGY AND CERTIFICATION

ПРОДУКЦИЯ АЛКОГОЛЬНАЯ, БЕЗАЛКОГОЛЬНАЯ И СОКОВАЯ, ДОБАВКИ ВКУСОАРОМАТИЧЕСКИЕ

Определение содержания синтетических красителей методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии


Стенда ртмнформ 2016

Сведения о стандарте

2 8НЕСЕН Государственным комитетом по стандартизации Республики Беларусь

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 22 июля 2015 г. Ne 78-П)

За принятие проголосовали:

Крапов наименование страны по МК (ИСО 3166) 004—67

Сокращенное иаиыеиоеанне национального органа по стандартизации

Минэкономики Республики Армения

Госстандарт Республики Беларусь

Госстандарт Республики Казахстан

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 1 сентября 2016 г. № 1022-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33406—2015 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2017 г.

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен. тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

ПРОДУКЦИЯ АЛКОГОЛЬНАЯ, БЕЗАЛКОГОЛЬНАЯ И СОКОВАЯ.

Определение содержания синтетических красителей методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Alcoholic, nonalcoholic and juices production, flavour additives. Determination of synthetic colouring matters by high

performance liquid chromatography

Дета введения — 2017—07—01

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на алкогольную, безалкогольную продукцию, соки, продук* ты переработки фруктов, ягод и овощей, вкусоароматические добавки и устанавливает метод определения содержания синтетических красителей методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее — ВЭЖХ) с использованием для регистрации диодно-матричного детектора.

Переченьсинтетических красителей, определяемых всоответствиис настоящим стандартом, приведен в таблице 1.

Название синтетического красителя

Солнечный закат — Sunset Yellow FCF

Понсо 4R — New Coccme

Азорубин — Chromotrope FB

Красный очаровательный — Allura Red AC

Определению не мешает синтетический краситель Е127 Эритроэин — Erytrozine (color index 45430).

Предел обнаружения данного метода для синтетических красителей составляет 0.5 мг/дм 3 (кг).

2 Нормативные ссылки

8 настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.1.004—91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.2.003—91 Система стандартов безопасности труда. Оборудование производственное. Общие требования безопасности

ГОСТ 1770—74 (ИСО 1042—83, ИСО 4788—80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ ИСО 5725*6—2003* Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ 245—76 Реактивы. Натрий фосфорнокислый одноэамещенный 2-водный. Технические условия

ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 29227—91 (ИСО 835-1—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 предел измерений (LOQ): Наименьшее значение массовой концентрации определяемого соединения, которое может быть измерено с установленной точностью в соответствии с настоящим стандартом.

3.2 диапазон измерений: Область значений массовой концентрации соединения в пробе, определяемая по настоящему стандарту.

4 Сущность метода

Смесь синтетических красителей Е110 Солнечный закат, Е102 Тартраэин, Е123 Амарант, Е122 Азорубин. Е124 Понсо 4R. Е129 Красный очаровательный разделяют на хроматографической колонке с использованием градиентной системы элюирования сприменением метода ион-парной обра-щенно-фаэовой хроматографии. Идентификацию и количественное определение осуществляют с помощью диодно-матричного детектора по величине сигнала абсорбции, интегрированного по времени. Дополнительную идентификацию красителей приводят спектральным методом.

5 Требования безопасности и требования к квалификации операторов

5.1 Требования безопасности

При выполнении работ персонал должен знатьи строго соблюдать на рабочем месте требования:

- электробезопасности — по ГОСТ 12.2.003;

- пожарной безопасности — по ГОСТ 12.1.004:

- техники безопасности при работе в химической лаборатории;

• техники безопасности, изложенные в эксплуатационных документах на средства измерений и оборудование, применяемые при проведении измерений.

5.2 Требования к квалификации операторов

К проведению измерений и обработке результатов хроматографического анализа могут быть допущены лица, имеющие специальное образование, опыт работы в области жидкостной хроматографии, изучившие руководство по эксплуатации жидкостного хроматографа, инструкцию по использованию системы обработки хроматографических данных и методов спектрального анализа.

6 Условия проведения измерений

При проведении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

• температура окружающего воздуха. (20 ± 5) °С;

* В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-6—2002.

• температура приготовления растворов. (20 ± 2) *С;

• относительная влажность воздуха. (65 ± 15) %:

• частота переменного тока. (50±5)Гц;

• напряжение в сети. (220 ± 10) Вт.

Помещения для проведения измерений должны быть оснащены приточно-вытяжной вентиляцией и подводкой воды.

7 Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы, реактивы

Высокоэффективный жидкостной хроматограф включающий:

• насос бинарный с вакуумным дегазатором;

• детектор диодно-матричный (диапазон длин волн 190—950 нм);

• колонку аналитическую обращенно-фазную хроматографическую С18. длиной 125 мм, внутренний диаметр 4 мм. диаметр зерна 5 мкм*:

- систему управления и обработки данных.

Весы лабораторные электронные, диапазон взвешивания 0.0100—220.0000 г. погрешность взвешивания 0.0003 г.

Иономер универсальный в комплекте с электродами, диапазон измерений от 1 до 19 ед. pH. погрешность 0.05 ед. pH.

Пипетки градуированные вместимостью 1.0; 5.0; 10,0; 25.0 см 3 по ГОСТ 29227.

Колбы мерные 2—50—2, 2—100—2. 2-250-2. 2—1000—2 по ГОСТ 1770.

Устройство для фильтрации элюирующих растворов.

Фильтры мембранные из регенерированной целлюлозы d - 47 мм. 0пор = 0.45 мкм.

Фильтры мембранные из регенерированной целлюлозы d - 25 мм. Рпор = 0,25 мкм.

Шприц медицинский вместимостью 5 см 3 .

Виалы для аетосамплера вместимостью 2 см 3 .

Е110 Солнечный закат, содержание основного вещества не менее 93,4 %.

Е102 Тартразин. содержание основного вещества не менее 68 %.

Е123 Амарант, содержание основного вещества не менее 93 %.

Е124 Понсо 4R. содержание основного вещества не менее 93 %.

Е122 Азорубин. содержание основного вещества не менее 90 %.

Е129 Красный очаровательный, содержание основного вещества не менее 80 %.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Ацетонитрил для 8ЭЖХ.

Натрий фосфорнокислый одноэамещенный двухводный по ГОСТ 245.

Гидроксид тетрабутиламмония (ТБАГ) 12.5 %-кый раствор.

Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками, вспомогательного оборудования с техническими характеристиками, а также материалов и реактивов по качеству не ниже указанных.

8 Подготовка к проведению измерений

Отбор проб продукции для определения синтетических красителей проводят в соответствии с действующими нормативными документами на отбор проб соответствующего вида продукции для определения показателей безопасности.

Отбор проб должен обеспечивать однородность и репрезентативность представленной пробы.

* Примером подходящего продукте является хроматографическая колонка Hyperstl BDS-C18. 4.0 х 125 мм. 5р м). Данная информация приведена для удобстве и не означает признания названного продукта пользователями настоящего стандарта.

Проба, доставленная в лабораторию на измерение, не должка быть повреждена или изменена во время транспортирования и хранения.

8.2 Приготовление элюирующих растворов

8.2.1 Элюирующий раствор А

В качестве элюирующего раствора А используют ацетонитрил для ВЭЖХ.

8.2.2 Элюирующий раствор В (0,01 М раствор натрия фосфорнокислого одноэамещенного (NaH2P04) + 0,001 М раствор тетрабутиламмония гидроксида (ТБАГ). 4,3—4,4 ед. pH)

Навеску массой 1.56 г натрия фосфорнокислого одноэамещенного двухводного и 2.6 см 3 12,5 %-ного раствора тетрабутиламмония гидроксида растворяют в мерной колбе вместимостью 1 дм 3 и доводят до метки дистиллированной водой, pH приготовленного элюирующего раствора В должен нахо-диться в диапазоне 4,3—4,4 ед. pH.

Перед применением все растворы фильтруют через фильтр из регенерированной целлюлозы с диаметром 47 мм. диаметром пор 0,45 мкм.

8.3 Приготовление градуировочных растворов

Навеску каждого красителя массой приблизительно 0.1250 г. взятую с точностью до 0.0001 г. взвешивают непосредственно в мерную колбу вместимостью 250 см 3 и доводят до метки дистиллированной водой при t — (20 ± 2) в С. Точную массовую концентрацию ко красителя в растворе А СА. мг/дм 3 . вычисляют с учетом содержания основного вещества по формуле '

где mi — масса навески >*го красителя, мг;

Р — содержание основного вещества /-го красителя;

VA — вместимость мерной колбы, см 3 .

Основной градуировочный раствор остается стабильным при хранении в холодильнике в течение 6 мес.

Массовую концентрацию промежуточного градуировочного раствора Св, мг/дм 3 , вычисляют по формуле 1

где СА — массовая концентрация ко красителя в растворе А. мг/дм 3 :

Для проведения градуировки используют свежеприготовленный раствор.

8.3.3 Приготовление многокомпонентных градуировочных растворов синтетических красителей

Массовая концентрация* градуировочного раствора, мг/см 1

Продукты пищевые. Методы идентификации и определения массовой доли синтетических красителей в алкогольной продукции

В документе освещены следующие темы:

  • ГОСТ Р 1.0-2004 Материалы строительные. Метод определения теплоты сгорания
  • ГОСТ Р 1.0-2004 Материалы строительные. Метод испытаний на возгораемость под воздействием малого пламени
  • ГОСТ Р 1.0-2004 Материалы строительные. Метод испытания кровли на пожарную опасность
  • ГОСТ Р 1.0-2004 Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения

Онлайн-журнал Attek experts предлагает свежие новости и актуальные статьи и обзоры новых нормативных документов. Самые важные события в области сертификации, охраны труда, экологии и промышленной безопасности, подробные информационные заметки и разъяснения спорных моментов.

Аннотация научной статьи по промышленным биотехнологиям, автор научной работы — Брынских Галина Тимофеевна, Михеева Лариса Алексеевна, Терехина Наталья Викторовна, Брынских Виктория Эдуардовна

Похожие темы научных работ по промышленным биотехнологиям , автор научной работы — Брынских Галина Тимофеевна, Михеева Лариса Алексеевна, Терехина Наталья Викторовна, Брынских Виктория Эдуардовна

QUALITATIVE AND QUANTITATIVE DETERMINATION OF FOOD DYES IN CARBONATED DRINKS

КАЧЕСТВЕННОЕ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ПИЩЕВЫХ КРАСИТЕЛЕЙ В ГАЗИРОВАННЫХ НАПИТКАХ

Г.Т. Брынских, Л.А. Михеева, Н.В. Терехина, В.Э. Брынских

Введение. Напитком называется жидкость, приготовленная с помощью синтетических вкусовых добавок, красителей и ароматизаторов. Цвет, придаваемый напитку красителем, является основным показателем, на который потребитель обращает свое внимание [8].

Натуральные красители, выделенные из красной свеклы, краснокочанной капусты, некоторых цветов и ягод, быстро разрушаются, поэтому их используют в продуктах с ограниченным сроком годности. К тому же они на вид не такие яркие, как синтетические, и не бросаются в глаза.

В сравнении с натуральными, синтетические красители обладают значительными технологическими преимуществами. Они дают яркие, хорошо воспроизводимые цвета, хорошо растворимы в воде, легко смешиваются между собой и гораздо менее чувствительны к различным технологическим факторам производства, имеют более длительные сроки хранения [3]. Именно поэтому синтетические красители нашли широкое применение в пищевой промышленности. В России разрешено к применению около 60 красителей. Препараты, изготовленные из них, содержат, как правило, 80-85 % основного красителя [7].

Органические синтетические пищевые красители представляют собой смесь органи-

ческих красящих веществ следующих групп: азокрасители, пиразолоновые, трифенилме-тановые, антрахиноновые, индигоидные, ксантеновые, хинолиновые и полициклические [7]. Все они получены химическим путем, и среди них нет безвредных. То есть организм человека ежедневно сталкивается с такими химическими ингредиентами, которые он просто не может переварить, усвоить и вывести из организма. Это провоцирует заболевания желудочно-кишечного тракта, поджелудочной железы, печени, сердца. Риск появления канцерогенного и мутагенного эффектов тоже возрастает [1, 2]. Поэтому контроль над содержанием любого синтетического красителя в пище крайне важен, и законодательное регулирование максимально допустимых уровней содержания синтетических пищевых красителей является важным профилактическим мероприятием по уменьшению вредного воздействия их на здоровье человека [7].

При оценке опасности красителей для человека принимаются во внимание данные токсикологических исследований, полученные за последнее время, согласно которым по параметрам острой пероральной токсичности синтетические пищевые красители можно отнести к 3-му и 4-му классам опасности [5]. Все это обусловливает необходимость уточ-

нения величин допустимых суточных доз красителей, что, естественно, приведет к изменению максимально допустимых уровней. При этом необходимо учитывать возможность одновременного поступления в организм человека нескольких пищевых продуктов, содержащих регламентируемый краситель, а также величину допустимого суточного потребления данного красителя в миллиграммах. При наличии в пищевом продукте нескольких синтетических красителей их суммарное содержание не должно превышать минимальный из нормативов этих красителей [5, 6].

Хроматографическое разделение обусловлено переносом компонентов подвижной фазы вдоль слоя неподвижной фазы с различными скоростями в соответствии с коэффициентами распределения разделяемых компонентов и зонами различной окраски.

Для количественного определения синтетических красителей разделившиеся окрашенные зоны соскабливали с пластинки в различные центрифужные пробирки. Доводили аммиаком рН растворов до 7. Добавляли по 10 мл воды, закрывали пробками и встряхивали в течение 1 мин. Удаляли пробки и центрифугировали при 2000 об/мин в течение 10 мин. Декантировали супернатант в другие центрифужные пробирки и повторяли центрифугирование.

Определяли поглощение чистых растворов на спектрофотометре при характерных для каждого красителя длинах волн максимума поглощения [3]. Для контроля чистоты красителя и подтверждения его структуры снимали спектр образца и сравнивали со спектром стандартного раствора. Содержание основного вещества Х, определенное спектро-фотометрически, рассчитывали по формуле

Х = (А • 100 • V) / (Э • 1000 • т),

где А - оптическая плотность исследуемого раствора; V - объем, см3, Э - коэффициент светопоглощения эталона; т - масса, мг.

Е110 (полоса желтого цвета). Тартразин по своей природе является каменноугольным дегтем и относится к промышленным отходам. Потребление данного вещества в больших количествах вызывает ангиоэдему, урти-карную сыпь, гиперактивность, беспокойный сон, раздражительность. Е110 может обусловить аллергические реакции, тошноту, он запрещен к применению в ряде стран [2, 7].

Значения соответствующие выбранной элюирующей системе, подтверждают наличие в напитках синтетических красителей.

азорубин (Е122), являющийся пищевым аллергеном и запрещенный в Австрии, Норвегии и Швеции [7], и понсо 4Я (Е124), который провоцирует приступы астмы и является канцерогеном.

Значения коэффициентов распределения рассчитанные как отношение расстояния Х, пройденного красителем в тонком слое сорбента, к расстоянию L=10 см, пройденному растворителем от старта до линии фронта, приведены в табл. 1.

Перечень и свойства синтетических красителей

Краситель Максимум поглощения, нм Коэффициент светопоглощения эталона (Э)

Тартразин (Е102) 427 0,053

Хинолиновый желтый (Е104) 412 0,096

Азорубин (Е122) 228 0,045

Понсо 4Я (Е124) 502 0,054

Значение Rf для синтетических красителей

Наименование напитка Наименование синтетического красителя Индекс Величина Rf

Желтый хинолиновый Е104 0,75±0,04

Азорубин Е122 0,60±0,05

Понсо 4Я Е124 0,40±0,05

Результаты расчетов представлены в табл. 3.

Содержание синтетических красителей в газированных напитках, мг/л

Наименование напитка Е102 Е104 Е110 Е122 Е124

3. Красникова Е. В. Современные методы контроля синтетических красителей / Е. В. Крани-кова, Н. В. Рудометова // Пищевые ингредиенты: сырье и добавки : научно-теоретический и производственный журн. - 2007. - № 1. -С. 31-35.

5. Санитарные правила и нормы: гигиенические требования по применению пищевых добавок : нормативное изд. - М. : Омега ; Л., 2007. - 274 с.

7. Смирнов Е. В. Пищевые красители : справ. / Е. В. Смирнов. - СПб. : Профессия, 2009. - 688 с.

QUALITATIVE AND QUANTITATIVE DETERMINATION OF FOOD DYES IN CARBONATED DRINKS

G.T. Brynskih, L.A. Mikheeva, N.V. Terehina, V.E. Brynskih

Ulyanovsk State University

1. Во всех исследуемых напитках содержатся синтетические красители.

1. Бессонов В. В. Пищевые красители. Их безопасность, источники получения и пути поступления в пищевые продукты для детей / В. В. Бессонов // Вопросы детской диетологии. - 2010. - Т. 8, № 4. - С. 37-49.

2. Бессонов В. В. Система контроля использования красителей в производстве пищевой продукции в Российской Федерации. Порядок выбора объектов исследования / В. В. Бессонов // Вопросы питания. - 2010. - Т. 79, № 1. - С. 59-66.

ГОСТ Р 52470-2005. Продукты пищевые. Методы идентификации и определения массовой доли синтетических красителей в алкогольной продукции

Настоящий стандарт распространяется на алкогольную продукцию и устанавливает:
- хроматографический метод качественного определения (идентификации) синтетических красителей в тонком слое сорбента;
- денситометрический метод определения массовой доли синтетических красителей в тонком слое сорбента (диапазон измеряемых массовых долей синтетических красителей от 0,012 до 0,250 г/кг);
- спектрофотометрический метод определения массовой доли синтетических красителей (диапазон измеряемых массовых долей синтетических красителей от 0,004 до 0,015 г/кг)

Название на англ.:Food products. Methods for identification and determination of artificial colours in alcoholic production
Тип документа:стандарт
Статус документа:действующий
Число страниц:27
Дата актуализации текста:01.08.2013
Дата актуализации описания:01.08.2013
Дата издания:27.04.2006
Дата введения в действие:01.01.2007
Дата последнего изменения:22.05.2013

  • Главная
  • FAQ
  • Развлечения
  • База ГОСТов РФ
  • База кодов ТН ВЭД
  • База кодов ОКП
  • База кодов МКТУ
  • База кодов ОКВЭД2
  • База кодов ОКПд2
  • Заказать звонок
  • Заказать сертификат
  • Консультация специалиста
  • Законодательство
  • Азбука сертификации
  • Лицензирование в России
  • Виды сертификации
  • Контакты



МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ
(МГС)
INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION
(ISC)

ГОСТ
31504-
2012


Москва
Стандартинформ
2013

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 24 мая 2012 г. № 41)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны
по МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны
по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа
по стандартизации

Минэкономики Республики Армения

(Поправка, Правка к ИУС 6-2019).

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 15 ноября 2012 г. № 884-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 31504-2012 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2013 г.

5 Стандарт подготовлен на основе применения ГОСТ Р 53752-2009

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

ГОСТ 31504-2012

Milk and milk products. Determination of preservatives and synthetic colors content by high performance
liquid chromatography method

Дата введения 1) - 2013-07-01

1) Дату введения стандарта в действие на территории государств устанавливают их национальные органы по стандартизации.

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 61-75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3117-78 Реактивы. Аммоний уксуснокислый. Технические условия

ГОСТ 3622-68 Молоко и молочные продукты. Отбор проб и подготовка их к испытанию

ГОСТ 4207-75 Реактивы. Калий железистосинеродистый 3-водный. Технические условия

ГОСТ ISO 5725-6-2003 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ 5823-78 Реактивы. Цинкуксуснокислый2-водный. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 10521-78 Реактивы. Кислота бензойная. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 13928-84 Молоко и сливки заготовляемые. Правила приемки, методы отбора проб и подготовка их к анализу

ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 26809-86 Молоко и молочные продукты. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу

ГОСТ 27752-88 Часы электронно-механические кварцевые настольные, настенные и часы-будильники. Общие технические условия

ГОСТ 29169-91 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:

3.1 метод высокоэффективной жидкостной хроматографии: Разделение веществ на отдельные компоненты, основанное на использовании сорбционных процессов в динамических условиях.

4 Сущность метода

Метод основан на экстракции консервантов и синтетических красителей из анализируемой пробы, качественном и количественном их определении с помощью ВЭЖХ с применением обращеннофазовой колонки и спектрофотометрического детектора в диапазонах измерений, указанных в таблицах 4 и 5.

5 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, материалы и реактивы

Весы по ГОСТ 24104 с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания ± 0,2 мг.

Хроматограф, включающий следующие элементы:

- колонка защитная длиной 250 мм, с размером внутреннего диаметра 4 или 4,6 мм, заполненная обращеннофазовым сорбентом с привитыми октадецильными группами с размером диаметра частиц 5 мкм;

- колонка длиной 125 мм, с размером внутреннего диаметра 4 мм;

- насос высокого давления с верхним пределом давления не менее 25 МПс, диапазоном регулирования подачи растворителя 0,1 - 5,0 см 3 /мин;

- устройство петлевое для ввода пробы рабочим объемом петли 0,010 и 0,020 см 3 ;

- детектор спектрофотометрический с переменной длиной волны, позволяющий проводить измерения оптической плотности при длине волны 235 нм, снабженный проточной кварцевой кюветой объемом не более 0,01 см 3 ;

- программное обеспечение для обработки полученных результатов измерений.

Микрошприц для ВЭЖХ вместимостью 0,025 или 0,050 см 3 .

pH-метр или универсальный иономер диапазоном измерения от 4 до 9 ед. pH с погрешностью измерения ± 0,05 ед. pH.

Часы электронно-механические по ГОСТ 27752.

Баня ультразвуковая лабораторная рабочим объемом не менее 2 дм 3 .

Насос водоструйный лабораторный по ГОСТ 25336.

Центрифуга лабораторная со скоростью вращения не менее 5000 об/мин.

Колбы мерные 1-10, 2-25, 1-50, 1-100, 1-250, 1-1000 по ГОСТ 1770.

Пипетки 1-2-1, 1-2-2 по ГОСТ 29169.

Дозаторы пипеточные переменного объема дозирования в диапазоне 0,040 - 1,000 см 3 с относительной погрешностью дозирования ± 1 %.

Цилиндры вместимостью 1-50-2, 1-100-2 по ГОСТ 1770.

Колба К-1-1000-29/32 по ГОСТ 25336.

Стаканы В-1-1000 по ГОСТ25336.

Фильтры бумажные обеззоленные марки ФОМ по ГОСТ 12026.

Фильтры мембранные с размером диаметра пор не более 0,5 мкм.

Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, х. ч., массовой долей основного вещества не менее 99,98 %.

Аммоний уксуснокислый, ч.д.а, по ГОСТ 3117.

Гексадецил-3-метиламмония бромид, х.ч., массовой долей основного вещества не менее 95,0 %.

Калий железистосинеродистый 3-водный, х.ч., по ГОСТ 4207, раствор массовой концентрации 150 г/дм 3 (раствор Карреза I).

Калий сорбат, ч., или сорбиновая кислота с массовой долей основного вещества не менее 95,0 %.

Кальций пропионат или пропионовая кислота с массовой долей основного вещества не менее 95,0 %.

Кислота уксусная, ч.д.а, по ГОСТ 61.

Набор синтетических красителей, содержащий:

- индигокармин, массовой долей основного вещества не менее 95,0 %;

- тартразин, массовой долей основного вещества не менее 94,6 %;

- понсо 4R, массовой долей основного вещества не менее 75,0 %;

- азорубин, массовой долей основного вещества не менее 50,0 %.

Натрий бензоат, ч., или бензойная кислота, ч.д.а., по ГОСТ 10521.

Натрий дигидрофосфат, х.ч., массовой долей основного вещества не менее 95,0 %.

Цинк уксуснокислый 2-водный по ГОСТ 5823, ч.д.а., раствор массовой концентрации 300 г/дм 3 (раствор Карреза II).

Спирт этиловый ректификованный по нормативным документам государства, присоединившегося к стандарту.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Допускается применение других средств измерений и оборудования с метрологическими и техническими характеристиками, а также реактивов и материалов по качеству не ниже вышеуказанных.

6 Отбор проб анализируемого продукта

Отбор проб - по ГОСТ 3622, ГОСТ 13928 и ГОСТ 26809.

7 Условия проведения измерений

При проведении измерений в лаборатории необходимо соблюдать следующие условия:

от 84 до 106 кПа.

Для проведения измерений применяют бидистиллированную воду, которую приготавливают следующим образом дистиллированную воду фильтруют через мембранный фильтр (размер диаметра пор 0,45 мкм), затем кипятят для удаления растворенного воздуха и охлаждают до комнатной температуры.

8 Определение массовой доли консервантов

8.1.1 Приготовление экстрагирующего раствора

Полученный раствор смешивают с ацетонитрилом в соотношении 3:2 (по объему).

Срок хранения раствора в плотно укупоренной посуде - не более 7 сут.

Раствор ацетата аммония массовой концентрации 0,8 г/дм 3 , приготовленный по 8.1.1, смешивают с ацетонитрилом в соотношении 65:35. Указанное соотношение является примерным, поскольку для обеспечения оптимального разделения пиков консервантов следует подбирать оптимальный состав подвижной фазы применительно к используемой хроматографической колонке. Полученную подвижную фазу фильтруют через мембранный фильтр. Перед использованием подвижную фазу дегазируют в круглодонной колбе под вакуумом на ультразвуковой бане.

Срок хранения подвижной фазы в плотно укупоренной посуде - не более 7 сут.

В качестве стандартных веществ используют бензойную, сорбиновую, пропионовую кислоты или их соли.

8.1.3.1 Приготовление основных растворов

Пробы стандартных веществ по (10,0 ± 0,1) мг помещают в мерные колбы вместимостью 50 см 3 . В колбы вносят около 10 см 3 ацетонитрила для растворения бензойной, сорбиновой и пропионовой кислот или такой же объем экстрагирующего раствора, приготовленного по 8.1.1, для растворения бензоата натрия, сорбата калия и пропионата калия. Содержимое колб перемешивают до полного растворения кристаллов, после чего объем содержимого в колбах доводят до метки экстрагирующим раствором. Колбы тщательно перемешивают, получают основные растворы.

Массовые концентрации бензойной, сорбиновой и пропионовой кислот в растворах, приготовленных из самих кислот, составляют 200 мг/дм 3 . Массовая концентрация бензойной кислоты в растворе, приготовленном из бензоата натрия, составляет 144 мг/дм 3 . Массовая концентрация сорбиновой кислоты в растворе, приготовленном из сорбата калия, составляет 150 мг/дм 3 . Массовая концентрация пропионовой кислоты в растворе, приготовленном из пропионата кальция, составляет 112 мг/дм 3 .

8.1.3.2 Приготовление рабочих растворов

Из основных растворов готовят не менее пяти рабочих растворов каждой кислоты в диапазоне массовых концентраций бензойной кислоты 0,2 - 1,5 мг/дм 3 , сорбиновой кислоты 0,1 - 3,0 мг/дм 3 и пропионовой кислоты 0,1 - 2,5 мг/дм 3 путем точного разведения основных растворов экстрагирующим раствором в мерной колбе вместимостью 100 см 3 . Растворы дозируют с помощью пипеточного дозатора. Приготовленные рабочие растворы профильтровывают через мембранный фильтр.

Срок хранения основных и рабочих растворов при температуре (4 ± 2) °С в плотно укупоренной посуде: бензойной кислоты - не более 6 мес, сорбиновой и пропионовой кислот - не более 2 мес.

8.1.4.1 Условия хроматографирования:

- длина волны детектора - 235 нм;

- чувствительность детектора - 0,08 единицы оптической плотности по шкале (ориентировочное значение);

- скорость потока подвижной фазы - 0,5 см 3 /мин (ориентировочное значение);

- температура - 50 °С;

- подвижная фаза - ацетат аммония с ацетонитрилом.

Проверку оптимальности условий хроматографического разделения осуществляют путем хроматографического анализа смешанного раствора бензойной, сорбиновой и пропионовой кислот массовой концентрации каждой кислоты не менее 1 мг/дм 3 . Данный раствор готовят из основных растворов бензойной, сорбиновой и пропионовой кислот по аналогии с методикой приготовления рабочих растворов по 8.1.3.2. Для хроматографического анализа петлю инжектора полностью заполняют анализируемым раствором. Эффективность хроматографического разделения признают удовлетворительной, если коэффициент разделения пиков сорбиновой, бензойной и пропионовой кислот составляет не менее 1,3. В противном случае для достижения требуемой эффективности разделения экспериментальным путем подбирают новый состав подвижной фазы (объемную долю ацетонитрила в ней) и скорость ее потока. При невозможности достижения требуемых условий эффективности хроматографического разделения аналогичным образом проводят испытания других колонок.

Чувствительность детектора устанавливают так, чтобы высота пика сорбиновой кислоты при хроматографическом анализе рабочего раствора массовой концентрации 1 мг/дм 3 не выходила за пределы рабочей шкалы регистрирующего устройства, но находилась вблизи ее верхней границы.

Контроль эффективности хроматографического разделения проводят не реже одного раза в две недели.

8.1.4.2 Градуировка хроматографа

Проводят хроматографический анализ всех рабочих растворов, полностью заполняя петлю инжектора. Регистрируют высоту пиков бензойной, сорбиновой и пропионовой кислот.

Массовая концентрация стандартных веществ в рабочем растворе С, мг/дм 3 , и высота пика каждого вещества h, мм, находятся в следующей функциональной зависимости:

C = Kh,

где K - градуировочный коэффициент, мг/дм 3 , мм;

h - высота пика стандартного вещества, мм.

Градуировочный коэффициент K, мг/дм 3 , мм, для бензойной, сорбиновой и пропионовой кислот вычисляют по результатам анализа рабочих растворов с помощью системы автоматизированной обработки данных или при ее отсутствии в составе хроматографа по методу наименьших квадратов, полагая свободный член в уравнении регрессии равным нулю, по формуле


где hi - высота пика бензойной, сорбиновой или пропионовой кислоты при анализе i-го рабочего раствора, мм;

Сi - массовая концентрация бензойной, сорбиновой или пропионовой кислоты в i-м рабочем растворе, мг/дм 3 .

8.1.5 Подготовка проб анализируемого продукта

Подготовка проб заключается в экстракции сорбиновой, бензойной и пропионовой кислот из анализируемого продукта.

(10,0 ± 0,001) г продукта переносят в мерную колбу вместимостью 250 см 3 . В колбу вносят 100 см 3 экстрагирующего раствора, приготовленного по 8.1.1, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин, после чего в нее вносят по 5 см 3 растворов Карреза I и Карреза II, тщательно перемешивая после каждого внесения. Содержимое колбы доводят бидистиллированной водой до метки, тщательно перемешивают и фильтруют через бумажный складчатый фильтр. 1 см 3 фильтрата переносят в мерную колбу вместимостью 10 см 3 , объем содержимого в колбе доводят до метки подвижной фазой для ВЭЖХ. Полученный раствор используют для хроматографического анализа. Перед анализом рекомендуется профильтровать анализируемый раствор через мембранный фильтр.

8.2.1 Качественное обнаружение консервантов

Проводят хроматографический анализ рабочих растворов массовой концентрацией: бензойной и пропионовой кислот - 0,2 мг/дм 3 и сорбиновой кислоты - 0,1 мг/дм 3 , полностью заполняя ими петлю инжектора. Регистрируют время удерживания и высоту пиков определяемых компонентов. Далее проводят хроматографический анализ экстракта из пробы или серии экстрактов из нескольких проб. При обнаружении на хроматограмме экстракта из пробы пиков, совпадающих по времени удерживания с пиками бензойной, сорбиновой и пропионовой кислот, регистрируют их высоту и фиксируют качественное обнаружение этих кислот.

Значения высоты пиков бензойной, сорбиновой и пропионовой кислот на хроматограмме экстракта из пробы, полученной по 8.2.1, используют для расчета массовых долей этих кислот при условии, что они не выходят за верхнюю границу диапазона градуировки хроматографа. В противном случае увеличивают степень разведения экстракта из пробы по 8.1.5 и проводят его повторный хроматографический анализ.

Массовую долю консерванта X, млн -1 , вычисляют по формуле


где h - высота пика сорбиновой, бензойной или пропионовой кислоты на хроматограмме экстракта из пробы, мм;

K - градуировочный коэффициент для сорбиновой, бензойной или пропионовой кислоты, мг/дм 3 , мм;

V1 - объем, в котором растворена часть экстракта из пробы перед хроматографическим анализом, см 3 ;

V3 - объем, в котором растворена проба экстракта из пробы при приготовлении экстракта, см 3 ;

V2 - объем части экстракта из пробы, взятый для разведения, см 3 ;

m - масса анализируемой пробы по 8.1.5, г.

Вычисления проводят до второго десятичного знака.

За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, выполненных в условиях повторяемости, округленное до второго десятичного знака, если выполнено условие приемлемости по 10.3.

9 Определение массовой концентрации синтетических красителей

(1,300 ± 0,001) г дигидрофосфата натрия и (1,000 ± 0,001) г гексадецил-3-метиламмонийбромида растворяют в 200 - 300 см 3 бидистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 см 3 , перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

Срок хранения раствора при комнатной температуре в плотно закрытой стеклянной таре - не более 1 мес.

9.1.2 Приготовление основного раствора смеси пяти синтетических красителей массовой концентрации 100 мкг/см 3

Пробы синтетических красителей помещают в мерную колбу вместимостью 1000 см 3 , добавляют 200 - 300 см 3 бидистиллированной воды и перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

Срок хранения раствора - не более 7 сут.

10 см 3 основного раствора, приготовленного по 9.1.2, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см 3 , добавляют небольшое количество бидистиллированной воды и перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

Градуировочные растворы смеси пяти синтетических красителей готовят по схеме, представленной в таблице 1.

Массовая концентрация каждого
синтетического красителя в рабочем
растворе, мкг/см 3

Часть рабочего раствора смеси пяти
синтетических красителей, см 3

Читайте также: